用高效液相色谱仪可以分离检测茶多酚含量的方法研究？为你提供资料如下：
HPLC法具有样品预处理简单、色谱柱选择范围宽、流动相种类及比例可任意变化、分析时间较短、检测方式多样等优点。1976年，H~fler和 Coggon首次将 HPLC法用于儿茶素的分析。他们使用丙酮 ／水混合液对绿茶进行预处理，所使用的流动相为乙酸 ／甲醇 ，N，N二甲基甲酞胺 ／水 (体积比 1：2：40：157)，色谱柱为 Bondapak Cl8(10 m，30cm×4mm id．)，280nm紫外检测 ，35rain内分离了 EGC，C，EC，EGCG，ECG和咖啡因。此后，HPLC法不断得到改进。Goto等采用水 ／己腈 ／磷酸体系通过两步线性梯度洗脱分析儿茶素，尽管该法流动相和梯度洗脱都比较复杂。并且柱温对分离的影响也很大，但可以在 20min内成功分离 8种儿茶素和咖啡因，检出限达 0．2ng。Dalluge等系统地研究了流动相组成和柱温对绿茶中六种主要儿茶素和咖啡因的影响。
重点讨论了色谱效率及两对异构体 (GCG／EGCG和C／EC)的基线分离，以保证准确的定量分析 ，指出含酸流动相与去活化单体 c。 柱的联合使用可显著提高色谱分离效率。Lin等采用等度洗脱和梯度洗脱两种方式分析茶叶，其等度洗脱的流动相为甲醇／水／甲酸 (体积比为9．5：8O．2：0．3)，在 60min内分离 了 EGC，C，EGCG，EC，( G和 ECG等6种儿茶素，检测灵敏度达到 1．5mg／L。梯度洗脱的流动相A为甲醇／甲酸／水 (体积比为20：0-3：79．7)，B为甲醇／甲酸 (体积比为99．7：0-3)，梯度为 100％A(0-10min)．100％ A一90％ A (11-15rain)，90％ A一70％ A (16—35min)．70％ A (36—50min)，在 36min内检 EGC，C，EGCG，EC，f：cc，ECG和CG等7种儿茶素。
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